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纸色谱法展开剂的选择要从欲分离物质在两相中的溶解度和展开剂的极性来考虑。在流动相中的溶解度较大的物质将会移动得快，因而具有较大的Rf值。对极性物质，增加展开剂中极性溶剂的比例量可以增大Rf值；增加展开剂中非极性溶剂的比例量可以减小Rf值。纸色谱法最常用的展开剂是含水的有机溶剂，如水饱和的正丁醇、正戊醇、酚等。此外，为了防止弱酸、弱碱的离解，加入少量的酸或碱，如甲酸、醋酸、吡啶等。